液相色谱仪在使用中，泵头吸液白管和检测口流通池是气泡产生的两个常见地点气泡的形成往往与温度上升压力下降等条件相关例如，温度上升或柱温上升至接近试剂沸点时，试剂会因汽化而产生气泡而当压力下降时，流动相中原本存在的微小气泡会因压力降低而增大，甚至多个小气泡聚集成大气泡，进而影响。

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当然你也可以选择循环挂柱，就是恒流泵的一头接你装蛋白的烧杯，从柱子中留下来的液体还用同一个烧杯接回去挂完之后，按理想来讲，你的蛋白在Ni柱中与Ni就结合了，杂蛋白多数在烧杯里，留下来了，当然肯定有少量杂蛋白也挂上了，这时候你要梯度洗脱，拿咪唑和你的buffer配，一般从0 20mM 40mM。

直轴斜盘式柱塞泵也有液压泵自身带有补油分泵向液压泵进油口提供压力油的自吸油型液压泵的自吸油能力很强，直轴斜盘式柱塞泵分为压力供油型和自吸油型两种压力供油型液压泵大都采用有气压的油箱无需外力供油靠气压供油的液压油箱，每次启动机器后，必需等液压渍箱达到使用气压后，才干操作机械。

因为高效液上色谱仪分析过程中，流动相的压力很高，几十到几百公斤高压，所以液相色谱仪的泵叫高压恒流泵，压力越高，溶解度越小所以高浓度的缓冲液，在高压流动相中将会析出更多的结晶，导致色谱柱，和泵头结构的损坏另外，液相色谱仪最怕的就是结晶盐的环境，浓度再低，也会有一些结晶滞留在分析。